Коротко и по делу — основные правила работы со световым микроскопом:
Подготовка и безопасность
- Держать прибор за тубус и основание при переносе (двумя руками).
- Перед работой проверить целостность и чистоту линз; протирать только салфеткой для оптики или мягкой тканью, без спирта на нанесённых покрытиях.
- Включить освещение, дать лампе прогреться 1–2 минуты.
Установка препарата
- Поместить предметное стекло в держатель и зафиксировать.
- Начинать осмотр с малого увеличения (обычно объектив 4× или 10×).
Фокусировка и изменение увеличения
- Фокусировать сначала крупным винтом (coarse) на низком увеличении, затем мелким винтом (fine).
- При переходе на объективы с большим увеличением предварительно опустить столик, чтобы объектив не повредил препарат.
- Общая формула увеличения: $M=M_{\text{окул}}\times M_{\text{объектив}}$.
Освещение и контраст
- Настроить конденсор и диафрагму для получения равномерного освещения; при необходимости выполнить Кёлерово освещение.
- Регулировать яркость реостатом и апертуру диафрагмы для оптимального контраста.
Работа с масляным объективом
- Использовать иммерсионное масло только с соответствующим 100× объективом.
- Нанести каплю масла на препарат, осторожно опустить масляный объектив; не использовать крупную фокусировку на масле.
- После работы удалить масло салфеткой для оптики и очистить объектив растворителем, если требуется.
Уход и хранение
- Выключить свет, опустить столик, установить малое увеличение, снять препарат.
- Чистить объективы и окуляры мягкой салфеткой; не прикасаться пальцами к линзам.
- Накрыть микроскоп пылезащитным чехлом, хранить в сухом месте.
Ограничения разрешающей способности
- Максимальное теоретическое разрешение определяется апертурой и длиной волны света, например по формуле Аббе: $d=\frac{0.61\lambda }{\mathrm{NA}}$. На практике разрешение светового микроскопа ~200 нм.
Калибровка и документирование
- При измерениях калибровать прибор с помощью предметной микрометрической шкалы.
- Записывать используемые окуляр/объектив, тип освещения и кондиции проникновения масла.
Избегать резких движений, сильного давления на столик и объективы, использования неподходящих растворителей и абразивов на линзах.