Для определения лучистой энергии используют оптическую плотность, которая является логарифмом отношения интенсивности прошедшего через образец света к интенсивности падающего на него света. Пропускание, с другой стороны, определяется как отношение интенсивности прошедшего через образец света к исходной интенсивности, выраженное в процентах.

Для оптимальных условий фотометрической реакции важно правильно выбрать длину волны излучения, концентрацию анализируемого соединения, время инкубации и другие параметры.

Для фотометрического определения железа (III) сульфосалициловой кислотой используется реакция образования комплекса между железом (III) и сульфосалициловой кислотой, который имеет интенсивный абсорбционный максимум при определенной длине волны. После образования комплекса измеряется оптическая плотность раствора, которая пропорциональна концентрации железа (III) в образце. Сравнивая результат с калибровочными кривыми, можно определить концентрацию железа (III) в исследуемом образце.