Коротко — что меняется

Конкурентное ингибирование
Vmax практически не меняется $Vmax,app=Vmax$.Km увеличивается $Km,app=Km\cdot (1+[I]/Ki)$ — снижается кажущаяся аффинность к субстрату.Неконкурентное $чистонеконкурентное$ Vmax уменьшается $Vmax,app=Vmax/(1+[I]/Ki)$.Km остаётся неизменным $Km,app=Km$.$Замечание$ При смешанном типе $mixed$ оба параметра могут изменяться — Vmax уменьшается, Km может либо увеличиваться, либо уменьшаться в зависимости от соотношений констант связи.

Какие графики строить для различения

Прямая зависимость v0 vs $$S$$ $михаэлисовыкривые$

Конкурентный: кривая «смещается вправо» $требуетсябольше[S]длядостижениятойжескорости$, плато $Vmax$ на том же уровне.Неконкурентный: плато снижается $меньшийVmax$, форма кривой не смещается по абсциссе $Kmнеизменен$.

Двойной обратный график $Lineweaver–Burk:1/vvs1/[S]$

Конкурентный: линии пересекаются на оси 1/v $одинитотжеy‑перехват=1/Vmax$, разные x‑перехваты → изменение Km.Неконкурентный $чистый$: линии пересекаются на оси 1/$$S$$ $одинитотжеx‑перехват=-1/Km$, разные y‑перехваты → изменение Vmax.Примечание: LB удобен визуально, но чувствителен к ошибкам при малых $$S$$.

Eadie–Hofstee $vvsv/[S]$ или Hanes–Woolf $[S]/vvs[S]$

Eadie–Hofstee: v = −Km·$v/[S]$ + Vmax. По этому графику:
Конкурентный: тот же Vmax $одинаковыйy‑перехват$, более крутой отрицательный наклон $Km\uparrow$.Неконкурентный: снижен y‑перехват $Vmax\downarrow$, наклон не меняется $Kmнеизменен$.Hanes–Woolf также более равномерно распределяет ошибки по диапазону и часто предпочтительнее LB.

Практические рекомендации для эксперимента

Измеряйте начальные скорости при 6–10 значениях $$S$$, охватывающих <<Km … >>Km.Делайте контроль $безингибитора$ и, по крайней мере, 2–3 концентрации каждого ингибитора.Предпочтительнее: нелинейная аппроксимация данных под соответствующую модель $Michaelis–Mentenсмодельюингибирования$ для получения Km, Vmax и Ki — это более корректно, чем аналитические прямые.Для определения Ki: можно использовать вторичные графики $напр.наклонлинииLBvs[I]дляконкурентного;y‑перехватLBvs[I]длянеконкурентного$ или прямой нелинейный фитинг.

Краткие формулы

Конкурентный: Vmax,app = Vmax; Km,app = Km · $1+[I]/Ki$.Чисто неконкурентный: Vmax,app = Vmax / $1+[I]/Ki$; Km,app = Km.

Если нужно — могу набросать пример экспериментального плана с конкретными концентрациями субстрата и ингибитора, и показать ожидаемые графики $исходныеданные+рисунки$.